目前免疫组化染色仍是淋巴瘤病理诊断、治疗靶点检测、预后评估的重要手段。现将淋巴瘤常用免疫组化染色组合列表如下,推荐加入病理科诊断系统方便调用。
一、考虑良性/非淋巴瘤病变免疫组化标志物组合
(包括LN反应性增生、Kikuchi淋巴结炎、Kimura病、皮病性淋巴结炎等)
1.标志物组合:CD3、CD20、CD21、CD30、CD68、Bcl-2、CD1a、S100、Ki-67、EBER
2.补充标志物:无症状淋巴结肿大,或有恶性肿瘤病史加做CK以除外转移癌
二、常见B细胞淋巴瘤免疫组化标志物组合
(一)大B细胞类淋巴瘤
细胞核大于正常组织细胞核(≥3个正常淋巴细胞),鉴别诊断包含DLBCL、MCL-多形性亚型。
1.标志物组合:CD3、CD5、CD10、CD19、CD20、CD22、CD30、Bcl-2、Bcl-6、MUM-1、c-Myc、CyclinD1、Ki-67、EBER
2.补充标志物:怀疑PMBL加做CD23、P63、CK、PD-L1
(二)中等大小B细胞类淋巴瘤
细胞核约等于正常组织细胞核/约合2~3个正常淋巴细胞,鉴别诊断包含B-淋母(LBL)、BL、MCL-母细胞样亚型。
1.标志物组合:CD3、CD5、CD10、CD19、CD20、CD22、CD79a、Bcl-2、CyclinD1、c-Myc、TdT、Ki-67、EBER
2.补充标志物:怀疑Burkitt淋巴瘤,加做MYC FISH检测
(三)小B细胞类淋巴瘤
细胞核小于正常组织细胞核/小于2个正常淋巴细胞大小,鉴别诊断包含FL、MALT/MZL、MCL、SLL/CLL等。
1.标志物组合:CD3、CD5、CD10、CD19、CD20、CD21、CD22、CD23、CD79a、Bcl-2、Bcl-6、CyclinD1、SOX-11、LEF1、HGAL、LMO2、Ki-67
2.补充标志物:
2.1 怀疑MALT淋巴瘤加染CD43、IgD、CK、Kappa原位杂交、Lambda原位杂交;怀疑胃MALT淋巴瘤再加做Hp
2.2 套细胞淋巴瘤加做P53
(四)浆细胞样肿瘤
鉴别诊断浆细胞瘤、浆母细胞淋巴瘤、伴有显著浆细胞分化的MZL、低分化癌、肉瘤、恶性黑色素瘤等。
1.标志物组合:LCA、CD3、CD20、PAX5、CD38、CD56、CD79a、CD138、ALK、c-Myc、SOX10、HMB45、CK、Ki-67、Kappa原位杂交、Lambda原位杂交、EBER
2.补充标志物:—
(五)Castleman病
1.标志物组合:CD3、CD5、CD10、CD20、CD21、CD138、Bcl-2、Bcl-6、CyclinD1、HHV8、Ki-67、Kappa原位杂交、Lambda原位杂交
2.补充标志物:—
三、常见T细胞淋巴瘤免疫组化标志物组合
(一)结外NK/T细胞淋巴瘤
1.标志物组合:CD2、CD3、CD7、CD8、CD20、CD56、Ki-67、GrB、TIA-1、PD-L1、EBER
2.补充标志物:—
(二)血管免疫母淋巴瘤(AITL)
1.标志物组合:CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD10、CD15、CD21、CD20、PAX5、CD30、Bcl-6、CXCL13、PD-1、ICOS、Ki-67、EBER
2.补充标志物:—
(三)T-淋巴母细胞淋巴瘤(T-LBL)
1.标志物组合:CD1a、CD2、CD3、CD5、CD7、CD10、CD20、PAX5、CD43、MPO、TdT、Ki-67、EBER
2.补充标志物:—
(四)间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)
1.标志物组合:LCA、CD3、CD4、CD7、CD15、CD20、PAX5、CD30、CD43、CD138、ALK、EMA、P63、Ki-67、EBER
2.补充标志物:—
(五)外周T细胞淋巴瘤(PTCL-NOS)
1.标志物组合:CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD20、PAX5、CD21、CD30、CD56、ALK、PD-1、Ki-67、EBER
2.补充标志物:
2.1 TFH细胞表型(CD10、Bcl-6、CXCL13、ICOS)
2.2 细胞毒T细胞表型(TIA-1、GrB)
(六)皮肤T细胞淋巴瘤(PCTCL)
1.标志物组合:CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD20、CD21、PAX5、CD30、CD56、CD68、CD123、ALK、GrB、TIA-1、PD-L1、PD-1、S100、Ki-67、EBER
2.补充标志物:—
四、霍奇金淋巴瘤免疫组化标志物组合
霍奇金淋巴瘤(HL)
1.标志物组合:LCA、CD3、CD15、CD20、CD30、PAX5、OCT2、BOB1、CD68、LMP1、ALK、EMA、Ki-67、EBER
2.补充标志物:怀疑NLPHL可加做CD21、PD-1(CD57)
说明
(1) 用于淋巴瘤诊断的所有免疫组化标志物表达均非绝对特异,应综合分析。
1.目前认为T-LBL中只有CD3是特异的谱系标志物,其他则难以区分谱系,如CD79a为常用B细胞标志物,但可在T-LBL中表达,需注意结合流式细胞学综合分析,防止误判为B-LBL。
2.怀疑PTCL时,出现1~2种成熟T细胞标志物(CD2、CD3、CD5、CD7等)表达减低、缺失(俗称"丢失")或明显减弱更支持诊断。
3.部分PTCL-NOS和皮肤PTCL会异常表达CD20,一些B细胞淋巴瘤(原发渗出性淋巴瘤)也会异常表达CD3,故而免疫组化组合中的T和B谱系标志均应包含2个以上。
4.ALK抗体选择:ALK1和ALK-Ventana(D5F3)均可,后者更为敏感。
(2) 侵袭性B细胞淋巴瘤相关标志物Bcl-2/c-Myc均应注意报告肿瘤细胞的阳性百分比(%),方便临床评估预后及进一步处理。对于以下情况强烈推荐增加FISH双打击(MYC/BCL2/BCL6)基因检测,辅助明确是否为HGBL-DHL及进一步分型。
1.肿瘤具高侵袭性(如Ki-67>90%,c-Myc>80%)。
2.Bcl-2/c-Myc蛋白"双高表达"。
3.惰性B细胞淋巴瘤(如低级别滤泡性淋巴瘤等)临床提示出现进展或病理证实转化为大B细胞淋巴瘤。
(3) MALT淋巴瘤诊断,CK染色有助于观察"淋巴上皮病变",免疫球蛋白轻链Kappa、Lambda核酸原位杂交有助于判断有无"轻链限制性重排",胃MALT加染Hp有助明确Hp感染相关性,必要时可加做MALT1基因和BCL10基因FISH等预测根除Hp治疗肿瘤疗效(免疫组化染色效果欠佳)。
(4) EB病毒编码的RNA(简称EBER)原位杂交是病理科检测EBV的"金标准",检测EBV首先选择EBER。
(5) 单凭免疫组化鉴别困难时,推荐增加IG/TCR基因重排克隆性分析。用于如下情况:
1.良恶性鉴别困难:如黏膜相关淋巴组织中B细胞反应性/非典型增生和MALT淋巴瘤鉴别困难,推荐IG基因重排检测;结内/结外T细胞非典型增生与结内/结外T细胞淋巴瘤鉴别,增加TCR基因重排检测可辅助明确诊断。
2.分型困难:CHL有时与"伴RS样细胞"的PTCL-NOS和AITL鉴别困难,增加IG/TCR基因重排检测可辅助明确诊断,此外增加针对淋巴瘤设计的靶向外显子测序也有帮助。
(6) 淋巴瘤治疗靶点检测的判读
1.报告阳性/阴性CD7

